技 术 简 介
环特生物提供基于斑马鱼模型的基因编辑服务,利用CRISPR/Cas9技术快速在斑马鱼模型中验证人类遗传病、筛选致病基因、研究基因功能及作用通路等,主要研究领域为婴幼儿发育畸形、罕见病、神经系统疾病、心脑血管疾病、血液病、生殖缺陷等。相较于哺乳动物基因编辑的试验周期长(一般1年以上)、表型不直观(一般需染色)、研究成功率低等缺点,斑马鱼基因编辑模型主要优势有:1.实验周期快,最快可在2周内进行疾病相关的表型观察(F0代高效瞬时敲降),3个月内完成稳定品系构建(杂合子F1代3个月,纯合子F2代6个月,子代数量多);2. 直观、多维度地活体动态观察(可对特定器官组织细胞进行荧光标记,利用透明斑马鱼活体观察和成像,哺乳动物上很难实现);3. 研究成功率高(与哺乳动物相比较,斑马鱼基因编辑效率高,样本数量多,可同时测试多个相关基因,最大化保证研究的成功率)。
▼ 斑马鱼基因编辑优势
▼ 技术积累
技 术 服 务 内 容
01、基因敲降
利用反义吗啡啉环寡核苷酸(Morpholino)特异性阻断mRNA的翻译或正确剪切,从而降低基因的表达水平,用于胚胎早期发育中基因功能研究;
利用CRISPR/Cas9技术特异性地瞬时破坏基因的编码序列,从而降低基因蛋白产物的表达水平来研究基因的功能,用于各个阶段的基因功能研究。
02、基因敲除
破坏该基因正常表达,主要用于在动物模型中研究基因的功能等。
03、基因敲入
定点插入外源核酸片段,用于标记基因的精准表达模式、破坏该基因正常表达、构建点突变、实现时间空间上控制基因表达等。
04、转基因品系构建
将外源基因随机整合到斑马鱼基因组中,在已知的启动子信息下可用于标记特定器官和细胞、指示特定基因的表达模式、调节特定基因的表达及功能水平等。
05、技术服务
斑马鱼研究方案设计、斑马鱼表型分析、疾病模型制备、活体成像及分析、高通量测序及分析、常规分子生化实验、免疫共沉淀、RNA免疫共沉淀、免疫荧光染色、药效测试、移植瘤模型,以及整体原位杂交等。
▼ 斑马鱼基因编辑品系
公司已开发基因编辑品系500多个,目前可提供的常用品系100多个。
部分品系示例:Ki(th-EGFP)、Tg(cmlc2:mRFP-EGFP-LC3)、Ki(tjp1a-EGFP)、Ki(tjp1a-EGFP)、老年痴呆症模型(AD)、Tg(ddx4:EGFP)、Tg(flk1:Lifeact-EGFP)、Tg(lyve1b:DsRed2)、Tg(elavl3:tdTomato)、Tg(itga2b:EGFP)。
▼ 学术论文
基于斑马鱼基因编辑的相关研究,已联合客户发表10余篇高影响因子的学术论文。
▼ 合作伙伴
▼ 关于环特
中国斑马鱼技术产业应用史,就是环特生物的发展史。凭借在斑马鱼PDTX技术及科研服务方面逾20年的深厚积累,环特生物以斑马鱼转基因、基因敲除、敲入,尤其是国际领先的基因置换技术为核心,专注于提供各种遗传工程斑马鱼的定制、斑马鱼基因编辑技术及斑马鱼疾病模型开发等专业技术服务,不仅可以实现构建复杂基因敲入,包括点突变、条件性敲除等难度较高斑马鱼基因编辑技术服务,而且可以通过斑马鱼基因编辑可视化技术,实现可视化基因型筛选,减少其它动物模型中大量的基因型筛选和鉴定工作,最大化发挥斑马鱼模型未来的应用优势。
环特在技术研发与应用领域,自有8300m²实验室,拥有实验动物生产与使用许可证,已通过CNAS、CMA和AAALAC认证,牵头起草发布团体标准17项,申请发明专利81项,自主开发斑马鱼模型200多种,发表SCI及核心期刊论文210多篇,已有7个新药项目成功将环特斑马鱼实验数据用于NMPA(国家药监局)的临床试验申报,累计完成项目8000多个,长期合作客户800多家。
服 务 咨 询
更多斑马鱼基因编辑服务,请拨电话咨询:0571-83782130,手机 17364531293(微信同号)。