斑马鱼模型研究体内炎症小体的激活和动力学

斑马鱼早期生命阶段的光学透明性为研究体内炎症小体的激活和动力学提供了前所未有的可能性。

胚胎中获得(mRNA)和功能丧失实验[morpholinos，转录激活因子样效应核酸酶(TALEN)和CRISPR-Cas技术]相对简单，可以研究特定分子的作用，包括参与炎症小体的分子，利用不同的刺激物和病原体可以更好地解释这些作用。

此外，斑马鱼还可以分析和可视化不同类型的免疫细胞，包括中性粒细胞和巨噬细胞;事实上，炎症小体的组装已经通过转基因斑马鱼系进行了研究，这些斑马鱼系要么已经可用，要么容易产生。在众多可用于研究造血和炎症小体的转基因系中，需要提到(图3):Tg(mpx:eGFP)和Tg(lyz:dsRed)，它们分别表达由中性粒细胞特异性启动子髓过氧化物酶和溶菌酶驱动的荧光eGFP或dsRed;Tg(mpeg1:eGFP)，由mpeg1启动子激活的标记巨噬细胞;Tg(lcr:eGFP)，由球蛋白调控序列驱动eGFP的表达，使红细胞发出绿色荧光。

此外，另外两个系也可用于研究红细胞生成:Tg(gata1:DsRed)，这可以使红细胞可视化，因为它们表达由gata1启动子驱动的DsRed;Tg(runx1:GAL4)及其标记的HSPCs。

基因敲入系Tg(asc:asc- egfp)允许炎症小体组装的实时单细胞可视化，而基因敲入系Tg(uas:ascΔCARD-eGFP)和Tg(uas:gpb4)可以分别抑制或激活特定细胞类型的炎症小体。

图3. 斑马鱼转基因系在炎症和炎性小体在造血中的研究。使用这些细胞系可以实现特定的造血细胞类型和炎症小体组装的实时可视化。化学和遗传筛选方法也适用于斑马鱼，在高通量筛选和体内成像方面具有无脊椎动物模型的某些优势，如高繁殖力、光学透明度、快速和外部发展等。